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分子診斷是指應用分子生物學方法檢測患者體內遺傳物質的結構或表達水平的變化而做出診斷的技術。分子診斷是預測診斷的主要方法，既可以進行個體遺傳病的診斷，也可以進行產(chǎn)前診斷。精準分子診斷是預防和控制重大傳染病的關鍵。

目前基于PCR擴增原理的分子檢測技術已在傳染病診斷中得到廣泛應用，然而，該項技術需精密儀器和專業(yè)操作人員，很難在現(xiàn)場快速檢測中得到應用。與傳統(tǒng)的PCR技術相比，恒溫擴增技術在POCT檢測領域展現(xiàn)出明顯優(yōu)勢，但是反應原理復雜、靶基因兼容性低和小型化設備缺乏成為POCT分子檢測領域的國際難題。

近日，廣東省農(nóng)業(yè)科學院動物衛(wèi)生研究所聯(lián)合華南農(nóng)業(yè)大學等單位在傳染病新型分子現(xiàn)場快速檢測領域取得重要進展。他們提出了基于線性鏈置換的恒溫擴增原理和掌式設備的一站式解決方案，通過深入研究恒溫擴增的原理，發(fā)現(xiàn)線性引物組合可有效啟動恒溫擴增反應，證實了線性鏈置換恒溫擴增檢測方法的反應原理，優(yōu)化得到了該方法的反應體系。通過分析LDIA方法對不同GC含量DNA的檢測能力，測試了該方法對不同靶基因的兼容性。

該研究進一步探索出以鏈置換探針為基礎的探針法線性鏈置換恒溫擴增檢測技術，增強了反應特異性，最低敏感性可達100拷貝。同時，該研究開發(fā)了一體化智能檢測設備與檢測軟件，集成恒溫加熱、熒光監(jiān)測為一體，實現(xiàn)了LDIA-SD技術的一站式應用，檢測結果可利用智能手機進行自動分析與云端傳輸，對于傳染病監(jiān)測預警具有重要意義。

同時，該項研究還突破了傳統(tǒng)的“恒溫擴增需特殊引物結構”認知，創(chuàng)建的LDIA-SD技術反應原理簡單、引物設計便捷、用戶使用環(huán)境友好，整個反應過程可在1小時完成，可現(xiàn)場或居家操作，在傳染病現(xiàn)場分子快速檢測領域具有廣闊的應用前景。

相關研究發(fā)表于Sensors and Actuators B: Chemical。

(資料來源：中國科學報)

關鍵詞： 反應原理 分子診斷 中國科學報